基于慢病毒的miRNA载体构建

基于慢病毒的miRNA载体构建

一、技术简介

miRNA是一种21－23 nt长的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过加工后生成，miRNA具有高度的保守性、时序性和组织特异性，而且这种特异性和时序性，决定了组织和细胞的功能特异性，表明miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用，因此miRNA的研究受到了生物学家的广泛关注。将miRNA构建到慢病毒载体，生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞。

慢病毒（Lentiviruses）属于逆转录病毒科，研究最为透彻的是HIV（human immunodeficiency vrus），其包括包装信号、长末端重复序列和顺式作用元件与编码反式作用蛋白的序列。将反式基因从病毒中分离而将我们感兴趣的基因导入进去。

二、实验流程

1. 将目的基因premiRNA和表达载体定向连接和重组。

2. 将重组质粒转化感受态细胞。

3. PCR鉴定转化子，克隆测序。

4. 高纯度质粒抽提。

三、服务说明及结果

1. 客户提供：miRNA序列。

2. 公司提供：基本实验步骤、构建好的载体载体、测序结果。

3. 实验周期：20-25个工作日。