裸鼠肺转移瘤

裸鼠（无胸腺鼠）肺转移瘤模型是癌症研究中常用的动物模型之一，因其缺乏功能性胸腺而没有有效的免疫系统，不会对植入的外来细胞产生免疫排斥反应。这使其成为研究肿瘤生物学和治疗方法的理想工具。以下是详细的介绍：

建立裸鼠肺转移瘤模型的步骤
1.选择合适的肿瘤细胞系

细胞系选择：选择人类或动物来源的癌细胞系，这些细胞系通常具有高度的转移能力，如肺癌、乳腺癌、黑色素瘤等。
细胞培养：在无菌条件下培养肿瘤细胞，确保其处于对数生长期（生长最快的阶段），以增加实验成功的可能性。
2.接种肿瘤细胞

接种方法：常用的方法包括尾静脉注射、皮下接种或直接注射到目标器官中。
尾静脉注射：将一定数量的肿瘤细胞悬浮液注射到裸鼠的尾静脉中，细胞通过血液循环转移到肺部。
皮下接种：将肿瘤细胞注射到裸鼠的皮下组织，观察其原位生长和后续的转移情况。
器官特异性注射：如需要特定器官的转移瘤，可将细胞直接注射到该器官中，如肝脏或肾脏。

一般根据肿瘤细胞接种方式，主要分为以下几种转移模型：

（1）尾静脉注射  

肿瘤细胞经尾静脉注射后，先通过肺部的毛细血管网进入动脉血液循环系统，可造成全身多发转移灶。但是由于肿瘤细胞较为粘稠易聚团，一般会被困在小鼠肺部微血管，主要形成肺转移，可能后期会造成远端器官的转移。主要用于建立肿瘤转移（血行通路）模型或血癌模型或者肿瘤肺转移。

（2）左心室注射 

肿瘤细胞经过左心室注射进入小鼠体循环，细胞经过粘附，降解及迁移等过程，最终造成不同器官的转移，可以很好的模拟肿瘤的血道转移过程。一般多造成骨、脑等部位转移。

（3）原位注射 

将肿瘤细胞移植于小鼠相应器官，如人乳腺癌细胞移植到裸鼠乳房垫上，人的肝癌移植到裸鼠肝叶上。该模型可模拟转移的全过程，包括最初侵袭组织，穿入血管和形成转移灶等步骤，更加接近人类肿瘤转移的过程。因此原位模型广泛用于抑制肿瘤转移和生长的药物筛选。

（4）腹腔注射

将肿瘤细胞注射到小鼠腹腔，操作简单，可出现一定比例的浸润、转移和腹水。主要是观察肿瘤细胞在腹腔内的转移情况，但是腹腔血液循环相对较少，不利于肿瘤转移的发生，适合某些肿瘤转移过程，如卵巢癌。

（5）其他注射方式 

除了上面常见的几种转移模型，还有用到的如：爪垫皮下移植（因爪垫皮下有丰富的淋巴管，可研究淋巴道转移）；肾包膜（肾包膜血管丰富，可立即供给移植肿瘤充分的氧及营养）；脾脏注射（可造成肝转移模型）等。

3.原位肿瘤生长

生长监测：使用活体成像技术（如荧光成像、磁共振成像等）定期监测肿瘤在注射部位的生长情况。
健康观察：观察裸鼠的体重、食欲、活动水平等，评估其健康状况。
4.转移过程

自然转移：部分肿瘤细胞会脱离原位肿瘤，通过血液或淋巴系统转移到其他器官，常见的转移部位包括肺、肝、脑等。
转移监测：使用影像学和分子生物学方法监测转移瘤的形成和发展。常用的检测方法包括活体成像、CT扫描、MRI等。
5.肺部转移瘤的评估

解剖和组织学分析：在实验结束时，通过解剖裸鼠并取出肺部组织，进行组织切片和染色（如H&E染色）以观察转移瘤的分布和形态。
免疫组化和分子分析：通过免疫组织化学染色（如Ki-67标记增殖细胞）和PCR、Western Blot等技术，进一步分析转移瘤的分子特征和生物学行为。
6.治疗和干预实验

药物测试：评估新型抗癌药物或治疗方法对肺转移瘤的抑制效果，常用的指标包括肿瘤体积、细胞增殖和凋亡情况等。
基因编辑：利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术研究特定基因在转移过程中的作用。

常见PDTX模型展示