质粒构建

质粒构建


质粒是使用广泛的基因操作工具,可以进行编码基因microRNAlncRNA的功能研究、启动子活性、转录因子3UTR调控研究等。


优势

1.  瞬时表达,导入细胞后24 小时就可以观察到目的基因的表达;
2.  构建技术简单,因而成本也比较低。


质粒

慢病毒

腺病毒

腺相关病毒

外源基因表达时间

24h开始表达
3-7

2-4天开始表达
长时间稳定表达

1-2天开始表达
7-14

7-14开始表达
细胞分裂不旺盛部位可长时间表达

插入片段大小

< 5-8kb

< 4kb

< 5-8kb

<2.8kb (包括必须的启动
子以及荧光或者标签元)

稳定细胞株筛选

可以,但较难操作

可以,外源基因整合于
主基因组,筛选简单

不可以,瞬时表达外源
基因传代后效果减弱

不可以

细胞实验

细胞系,部分细胞
转染效率较低

首选,广谱,感染效率高

广谱,感染效率高,
适合原代非增殖细胞感染

不适合细胞实验

动物实验

不适合

适合,根据观察时间
和注射部位选择

较适(免疫原性)
根据观察时间和注射部位选择

首选,根据观察时间和注射部位选择

滴度

最高可109TU/ml

1012pfu/ml

1012-13v.g/ml

质量标准

吉凯采用高纯度转染级试剂盒进行抽提,按ISO9001标准进行严格的质量控制,提供高标准质粒。


-细胞级

-动物级

产品特点

纯度优1CsCI超速离心纯化的质粒

纯度优2CsCI超速离心纯化的质粒

适用范围

适用于永生化细胞系的转染试验、特殊的修饰反应
BACcosmid建库等试验

基因治疗、细胞显微注射DNA疫苗、基因沉默
( RNAi)等要求严格的操作,以及转染原代细胞、
敏感细胞、悬浮细胞等对内毒素特别敏感的细胞株

质量标准

内毒< 50EU/ml,超螺旋比> 90%
(OD260/280) =1.8-2.0,> 200ng/ul

内毒< 10EU/ml,超螺旋比> 90%
(OD260/280) =1.8~2.0,浓> 500ng/ul

载体选择

吉凯提供完善的慢质粒产品体系,用于操作编码基因和非编码基因,lncRNAmicroRNAcircRNA。以下慢病毒载体可供您选择。可添加网页下方的技术微信给您对应推荐适合的载体

调控方式

载体

元件顺序

bp

原核抗性

真核抗性

过表达

GV609

MCS -firefly_ Luciferase

4994

Ampicillin


GV608

MCS -firfly_ Luciferase

4994

Ampicillin


GV486

CMV-left circular frame-<br>MCS-right circular frame-EF1a-<br>copGFP- SV40-Neomycin

6275

Kanamycin

Neomycin

GV485

CMV-left circular frame-<br>MCS-right circular frame-<br>SV40-neomycin

6349

Ampicillin

Neomycin

GV272

SV40-firefly_ Luciferase-MCS

5010

Ampicillin


GV238

MCS -firefly_ Luciferase

4994

Ampicillin


GV230

CMV-MCS-EGFP-<br>SV40-Neomycin

4733

Kanamycin

Neomycin

GV219

CMV -MCS- SV40-Neomycin

5427

Ampicillin

Neomycin

GV146

CMV-MCS-IRES-EGFP-<br>SV40-Neomycin

5308

Kanamycin

Neomycin

GV141

CMV-MCS-3FLAG-<br>SV40-Neomycin

5508

Ampicillin

Neomycin

RNAi

GV102

hU6-MCS-CMV-GFP-SV40-Neomycin

6380

Ampicillin

Neomycin

microRNA-down

GV249

hU6- MCS-CMV-GFP-SV40-Neomycin

6380

Ampicillin

Neomycin

microRNA-up

GV268

CMV -MCS-SV40-Neomycin

5427

Ampicillin

Neomycin

GV251

hU6-MCS -CMV-GFP-SV40-Neomycin

6380

Ampicillin

Neomycin