Cas9载体构建与验证服务

Cas9载体构建与验证服务

CRISPR被认为是研究和发现药物的强大的工具，可以在不引入外来DNA的情况下，以高度定向的方式改变任何细胞中的任何基因。CRISPR/Cas9相对于以前的基因编辑形式，如TALENs和锌指核酸酶(ZFN)的优点是，它更容易操作，并且在执行双等位基因修改方面具有更高的效率。

广州安尔诺提供基于GenCRISPR™的基因编辑服务，可以使用任何哺乳动物细胞系，针对任何基因生产基因编辑的细胞。

此系统的工作原理是crRNA (CRISPR-derived RNA) 通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA) 结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物，此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点处剪切双链 DNA，从而实现对基因组DNA序列进行编辑；而通过人工设计这两种 RNA，可以改造形成具有引导作用的gRNA (guide RNA)，足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。

作为一种 RNA导向的 dsDNA 结合蛋白，Cas9 效应物核酸酶是已知的第一个统一因子 (unifying factor)，它能够共定位 RNA、DNA 和蛋白，从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null)融合，并表达适当的 gRNA，即可靶定任何 dsDNA 序列，而 RNA 可连接到gRNA 的末端，不影响 Cas9 的结合。因此，Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA，这为生物体的研究和改造带来巨大潜力。

公司提供的产品说明：

1.       质粒Cas9载体

1）客户设计的靶点，我们构建

2）我们设计三个靶点，承诺至少一个有效（测序、T7酶切有效，非WB验证）

3）我们设计三个靶点， 在细胞筛选验证有效后寄送

2.       慢病毒Cas9载体

1）客户设计的靶点，我们构建

2）我们设计三个靶点，承诺至少一个有效（测序、T7酶切有效，非WB验证）

3）我们设计三个靶点， 在细胞筛选验证有效后寄送

3.       非常规用途的Cas9载体：

1）       非编码RNA（lncRNA与环状RNA）的Cas9敲除

2）       甲基化修饰的Cas9载体

提供Sanger测序与T7酶切验证服务