直结肠癌动物模型

直结肠癌动物模型是指在实验室条件下，通过特定的方法在动物身上诱导出类似人类直结肠癌的病理变化，用于研究直结肠癌的发病机制、评估治疗方法或药物的效果。直结肠癌（Colorectal Cancer，CRC）是一种常见的消化系统恶性肿瘤，其特点是起源于结肠或直肠的黏膜上皮细胞，并逐渐发展为恶性肿瘤。

建立直结肠癌动物模型，通常会用到以下方法：

化学诱导：使用特定的化学物质（如氧化偶氮甲烷AOM、二甲基肼DMH等）来诱导结肠或直肠的肿瘤形成。这些化学物质可以引起DNA损伤和突变，从而促进肿瘤的发生。

遗传工程：通过基因敲入或敲除技术，在动物体内引入特定的基因突变，以模拟人类直结肠癌中常见的遗传变异。例如，使用APC基因突变的小鼠模型来研究家族性腺瘤性息肉病（FAP）相关的直结肠癌。

移植模型：将人类直结肠癌细胞系或肿瘤组织移植到免疫缺陷的动物（如裸鼠）体内，以研究肿瘤的生长和发展。

炎症模型：通过诱导慢性炎症（如使用硫酸葡聚糖钠DSS诱导结肠炎）来模拟炎症相关的直结肠癌。

造模机制
选用人源性或动物源性标准细胞株或组织块直接接种或移植入具有免疫缺陷功能的裸小鼠或SCID鼠，荷瘤鼠不排斥同种异体或异种组织器官的移植，被移植瘤保持原组织结构或功能，故已大量应用于肿瘤病因学、发病机制、免疫学、药理学和治疗学等方面的研究。

造模方法
1. 皮下移植瘤模型

在无菌条件下取下人肿瘤组织若干，经处理后置于RPMI 1640液中剪成1～2mm小块，或直接以建标准细胞株的结肠癌细胞制成单细胞悬液(5×100000000～2.5×100000000000/L)移植入裸小鼠皮下；移植部位有颈部、腋窝、背部、腹股沟区、胸壁等，以颈部生长速度最快，逐日观察，待肿瘤长至1.0～1.5cm时处死裸鼠，取出肿瘤组织或细胞后仍按上述方法传代。

2. 原位移植瘤模型

通常用皮下移植瘤模型稳定传代的肿瘤组织剪成1mm直径碎块备用。实验动物经腹腔麻醉，皮肤消毒后取腹部正中切口进腹，拖出盲肠，刮除少许浆膜组织，将1立方毫米肿瘤组织块缝合在损伤的浆膜处，或直接将肿瘤块塞入损伤浆膜处形成凹槽，在瘤块表面滴一滴OB胶固定瘤体；将盲肠回纳腹中逐层关腹。或直接经肛门直肠黏膜下注射肿瘤细胞，可减少麻醉和手术创伤及对小鼠免疫系统和肿瘤细胞生长的影响。

3. 结肠造口移植模型  

指先将实验小鼠通过结肠造口手术外置再将肿瘤细胞或组织接种于结肠黏膜下层观察其在原位生长和发生转移的情况。一般过程：小鼠麻醉后在左腹部皮肤及腹膜剪一小口，将盲肠提出腹壁约0.5cm，把盲肠与周围皮肤缝合固定术后23天可结痂，约1周后脱落，露出肠管，将CRC细胞或组织接种于造口的结肠黏膜下层即可。

模型特点
不同细胞株在移植模型中的成瘤率、肿瘤的生长和转移率并不一致，因此在CRC肿瘤模型的研究中应尽量选用转移率高的细胞株以便更好地模拟人CRC发生发展的自然过程。不同接种方法、接种部位引起的模型特点详见表7-4。此外，还有其他人源性结肠癌细胞株如HT29、 SW480、SW620等，及小鼠结肠癌细胞株TCM37、 CT26和MCA38等，接种同系小鼠可以建立移植瘤模型。

CRC动物模型方法的比较

模型评估和应用

1. 皮下移植瘤模型  

建立皮下移植瘤模型操作最简单，成瘤率高，可方便实时监测肿瘤的生长情况和评估治疗效果，但是很难真实模拟人CRC的原位生长情况，使其难以表现出恶性肿瘤侵袭和转移的特性；但是，也有SCID鼠皮下瘤发生肺转移的报道，而原位的细胞和组织移植则更好地弥补了这一点。

2. 原位移植瘤模型  

原位细胞和组织移植可全面模拟CRC的发生、发展和转移的过程，为研究人CRC的发病机制、转移和评价新的治疗方法提供了较理想的动物模型。原位组织移植模型与原位细胞移植模型相比，得到的恶性肿瘤组织细胞表面结构完整，细胞间协同性好，原位移植的成瘤率高，能够更好地体现原位生长和转移的能力，是目前与临床最类似的肿瘤动物模型，成为最常用的建立CRC动物模型的方法之一。但是该方法手术操作过程复杂，要求较高，耗时较长，麻醉和手术对裸鼠造成的创伤较大，术后可能发生肠梗阻导致造模失败，且不易观察肿瘤生长情况，只有处死后才能观察肿瘤生长和干预的结果。

3. 结肠造口模型  

优点在于肿瘤处于体表，易于直接观察进行评价和反复取样种植，不成功可重复种植，减少了动物使用量。缺点同样是手术操作难度大和对小鼠造成的创伤大。

需确认的信息
1. 模型种属（大鼠还是小鼠或是其他种属）
2. 动物体重有无要求，年龄有无要求
3. 雌雄有无要求
4. 模型构建具体方案
5. 取材要求（采血、取组织样本）