细胞侵袭

细胞侵袭

一、技术简介

细胞侵袭是指细胞向局部侵犯,细胞侵袭实验可用来研究细胞和胞外基质之间的相互作用。胞外基质不仅为细胞提供了结构支架,同时也包含了许多细胞生存及生长过程中生物功能因子。细胞可以分泌一种酶,该酶能够降解胞外基质中特定的组分,从而使细胞向化学引诱剂移动,或者直接形成一种生长的状态。胞外基质胶模仿体内细胞外基质胞外基质环境,包含了支撑细胞结构的最基本的组分。转移性肿瘤细胞由于其高迁移和/或降解胞外基质的酶活从而表现出较强的侵袭性。铺有 Matrigel 胶的 Transwell 小室可用于检测细胞侵袭能力。

Transwell的基本原理是将transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层培养液以铺有 Matrigel 胶聚碳酸酯膜相隔,Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8 μm,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌水解酶,并通过变形运动才能穿过这种铺有Martrigel的滤膜,这与体内情况较为相似。铺有Martrigel的滤膜放在以细胞小室上下室之间,铺有Martrigel面朝向上室,在下室中加有趋化剂,上室加入重悬的瘤细胞,具有侵袭能力的细胞在趋化剂诱导下开始穿膜运动。肿瘤细胞穿过重建基质膜的能力与它的体内侵袭转移能力表现出较好的相关性,可以用重建基质膜模型初筛抗侵袭药物。

二、实验流程

1. 基质胶铺板。

2. 制备细胞悬液。

3. 接种细胞。

4. 检测穿过的细胞数。

5. 结果统计分析。

三、服务说明及结果

1. 客户提供:细胞株,所需药品,药物处理方式和浓度。

2. 公司提供:基本实验步骤、图片、数据分析结果、剩余药品。

3. 实验周期:10个工作日,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。